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  • 人羊膜上皮干细胞通过调节M1/M2型巨噬细胞极化减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究
    疏文志, 杨梦凡, 潘斌华, 苏仁义, 林祖源, 杨墨丹, 张镇胜, 宋一粟, 卢正阳, 郑树森, 徐骁, 魏绪勇
    中华移植杂志(电子版) . 2023, 17 (01): 36-41.
    摘要 ( 68 ) HTML ( 0 ) PDF ( 2261 ) ( 5 )
    目的

    探讨人羊膜上皮干细胞(hAECs)对小鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。

    方法

    将10只C57BL/6小鼠随机分为对照组(IRI+PBS组)和实验组(IRI+hAECs组),每组各5只。IRI+PBS组经阴茎背静脉注射PBS(100 μL),IRI+hAECs组经阴茎背静脉注射hAECs(1×105个),注射后0.5 h进行常温下缺血1.5 h、再灌注6 h。检测小鼠血清ALT、AST和乳酸脱氢酶(LDH)水平,HE染色观察小鼠肝组织病理变化,免疫组织化学染色观察巨噬细胞(F4/80)以及M1(CD68)、M2 (CD206)型巨噬细胞浸润情况。比较两组凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-7以及炎症因子IL-6、IL-23、TNF-α和IL-β mRNA相对表达量。符合正态分布的连续变量资料采用独立样本t检验比较。P<0.05为差异具有统计学意义。

    结果

    与IRI+PBS组相比,IRI+hAECs组小鼠肝组织病理损伤明显改善。IRI+hAECs组小鼠血清ALT、AST和LDH分别为(1 456±20)、(1 375±49)和(2 435±147)U/L,IRI+PBS组分别为(3 919±48)、(3 142±145)和(3 499±147) U/L,差异均有统计学意义(t=47.13、11.53和4.53,P均<0.05)。IRI+hAECs组BCL-2、BAX、Caspase-3和Caspase-7 mRNA表达水平分别为(0.20±0.05)、(0.19±0.09)、(0.46±0.13)和(0.27±0.03),均低于IRI+PBS组的(1.01±0.16)、(1.02±0.28)、(1.01±0.17)和(1.00±0.11),差异均有统计学意义(t=8.45、4.88、4.39和10.79,P均<0.05)。免疫组化染色结果显示,巨噬细胞在IRI+hAECs组浸润更低。IRI+hAECs组IL-6、IL-23、TNF-α和IL-β mRNA水平分别为(0.38±0.04)、(0.33±0.05)、(0.43±0.08)和(0.12±0.04),均低于IRI+PBS组的(1.10±0.11)、(1.00±0.05)、(1.00±0.02)和(1.10±0.06),差异均有统计学意义(t=11.27、16.37、12.96和22.34,P均<0.05)。M1型巨噬细胞在IRI+hAECs组表达明显降低,M2型巨噬细胞比例升高。

    结论

    hAECs通过调节M1/M2型巨噬细胞极化,减轻炎症反应,从而在小鼠肝脏IRI中发挥保护作用。

图2 IRI+PBS组和IRI+hAECs组小鼠缺血再灌注术后肝组织HE染色结果注:IRI.缺血再灌注损伤;hAECs.人羊膜上皮干细胞;虚线范围内为坏死区域;a和b. IRI+PBS组(×4和×40); c和d. IRI+hAECs组(×4和×40)
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