目的 探讨基因编辑猪-恒河猴异种心脏移植前后供体猪心组织S100钙结合蛋白A8/A9(S100A8/A9)表达及其与巨噬细胞炎症反应的关系。
方法 分别选取3头巴马基因编辑猪作为供体,3只成年雄性恒河猴作为受体。手术方式为心脏异位移植。应用蛋白质印迹法(WB)检测S100A8/A9、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、TNF-α、IL-18、TGF-β和IL-10表达水平。应用免疫组织化学染色检测CD3、CD19和CD68表达水平。正态分布计量资料组间比较采用成组t检验,非正态分布计量资料组间比较采用Wilcoxon符号秩和检验。P<0.05为差异有统计学意义。
结果 供、受体心脏均成功复搏。WB检测结果示移植前后猪心组织S100A8相对表达量分别为(1.000±0.000)和(3.234±0.790),S100A9相对表达量分别为(1.000±0.000)和(2.796±0.617),差异均有统计学意义(t=-4.893和-5.042,P均<0.05)。HE染色结果示移植后基因编辑猪心肌细胞广泛坏死,并可见出血,伴炎性细胞浸润。免疫组织化学染色结果示移植后基因编辑猪心肌组织CD68表达呈阳性。三例受体猴术后外周血单核细胞百分比未见持续升高趋势。猪心组织移植前后iNOS相对表达量分别为(1.000±0.000)和(13.763±0.229),Arg-1分别为(1.000±0.000)和(0.143±0.071),差异均有统计学意义(t=-96.518和20.930,P均<0.05)。移植前猪心组织TNF-α、IL-18、TGF-β、IL-10相对表达量均为(1.000±0.000),移植后相对表达量分别为(1.447±0.108)、(3.656±0.596)、(0.741±0.034)和(0.682±0.049),差异均有统计学意义(t=-7.126、-7.725、13.164和11.178,P均<0.05)。
结论 异种移植后猪心组织S100A8/A9、iNOS及促炎因子表达水平均显著升高,抗炎标志物水平降低,提示S100A8/A9可能通过驱动巨噬细胞M1极化加重异种心脏移植炎症反应。